酸堿度和溫度是細胞培養(yǎng)過程中兩個重要的條件,對于靈芝的深層發(fā)酵培養(yǎng)來說同樣如此。在利用細胞搖瓶進行靈芝的深層發(fā)酵培養(yǎng)時,對酸堿度和溫度的要求如下:
一、酸堿度:
1. 靈芝液體深層發(fā)酵最適宜的酸堿度為pH4.56,過酸過堿對菌絲生長都不利,pH值過低菌絲粗菌絲短生長慢,pH值過高菌絲細弱菌絲可用率低。
2. 靈芝菌絲在生長過程中會產(chǎn)生酸性物質(zhì)會使培養(yǎng)基pH下降,當pH降至3.5以下時菌絲就不會生長。菌絲亦會開始自溶菌絲自溶后培養(yǎng)基pH就會上升所以在發(fā)酵時若測定結果pH有突然明顯上升趨勢時就可能是菌絲已開始自溶。
3.由于發(fā)酵過程中培養(yǎng)基pH值會發(fā)生變化所以在發(fā)酵時每隔一定時間〈一般為78小時〉就要測pH值,當培養(yǎng)基pH值急劇下降菌絲生長不良時就要用氨水或堿液調(diào)節(jié)培養(yǎng)pH。
二、溫度:
1.靈芝深層發(fā)酵的適宜溫度為25~30℃。發(fā)酵時必須給以適當?shù)臏囟葪l件,高于30℃時菌絲生長快,但菌絲得率低,且容易自溶,發(fā)酵液的色澤深,高于36℃時,靈芝菌絲停止生長,40℃以上時,菌絲很快死亡。
2.發(fā)酵溫度會對發(fā)酵產(chǎn)物積累發(fā)生影響,溫度高,菌絲呼吸強度大,營養(yǎng)物質(zhì)的消耗量多,發(fā)酵產(chǎn)物累積少,溫度低,菌絲生長慢,營養(yǎng)物質(zhì)的消耗少,發(fā)酵代謝物多,但溫度低,發(fā)酵周期就會延長,成本就會提高。所以發(fā)酵時,前期以菌絲生長為主要階段,溫度可控制在27~28℃左右最佳,以后,當?shù)酱x產(chǎn)物累積階段時,培養(yǎng)溫度應降到20℃左右最佳。
綜上所述,利用細胞搖瓶對靈芝進行深層發(fā)酵培養(yǎng)時要控制好酸堿度和溫度,這樣才能確保菌絲的生長狀態(tài)。