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細(xì)胞工廠(chǎng)是貼壁細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)常會(huì)用到的一種耗材，在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中我們要實(shí)時(shí)掌握細(xì)胞的生長(zhǎng)狀態(tài)，根據(jù)具體情況做出相關(guān)調(diào)整?？梢酝ㄟ^(guò)MTT法對(duì)細(xì)胞的活性進(jìn)行檢測(cè)，從而確定細(xì)胞生長(zhǎng)情況。

MTT法又稱(chēng)MTT比色法，是一種檢測(cè)細(xì)胞存活和生長(zhǎng)的方法。其檢測(cè)原理為活細(xì)胞線(xiàn)粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍(lán)紫色結(jié)晶甲臜并沉積在細(xì)胞中，而死細(xì)胞無(wú)此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細(xì)胞中的甲臜，用酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀在570nm波長(zhǎng)處測(cè)定其光吸收值，可間接反映活細(xì)胞數(shù)量。在一定細(xì)胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細(xì)胞數(shù)成正比。該方法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測(cè)、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細(xì)胞毒性試驗(yàn)以及腫瘤放射敏感性測(cè)定等。它的特點(diǎn)是靈敏度高、經(jīng)濟(jì)。

在檢測(cè)細(xì)胞工廠(chǎng)內(nèi)細(xì)胞的活性之前，非常重要的一個(gè)步驟便是配制MTT。通常，此法中的MTT濃度為5mg/ml。因此，可以稱(chēng)取MTT 0.5克，溶于100 ml的磷酸緩沖液（PBS）或無(wú)酚紅的培養(yǎng)基中，用0.22μm濾膜過(guò)濾以除去溶液里的細(xì)菌，放4℃ 避光保存即可。在配制和保存的過(guò)程中，容器盡量用鋁箔紙包住。

在利用MTT法測(cè)定細(xì)胞工廠(chǎng)內(nèi)的細(xì)胞活性時(shí)要注意，MTT有致癌性，用的時(shí)候小心。這種方法只能用來(lái)檢測(cè)細(xì)胞相對(duì)數(shù)和相對(duì)活力，但不能測(cè)定細(xì)胞絕對(duì)數(shù)。在用酶標(biāo)儀檢測(cè)結(jié)果的時(shí)候，為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的線(xiàn)性，MTT 吸光度盡量在0-0.7 范圍內(nèi)。