血清是細胞生長的必備營養(yǎng)物質,我們經(jīng)常會發(fā)現(xiàn)血清培養(yǎng)基瓶內的血清出現(xiàn)肉眼可見的沉淀,這些沉淀主要是纖維蛋白、磷酸鈣等物質。那么如何避免這些沉淀的出現(xiàn)呢?
血清瓶內的血清出現(xiàn)沉淀,其原因是多方面的,但這些沉淀一般不會影響血清的品質,但出現(xiàn)后需要花費時間進行處理,費時費力。如果操作的時候多加注意,可以在很大程度上避免沉淀的出現(xiàn):
首先,應按照逐步解凍的方式正確解凍血清:從-20℃取出后,置于 4℃冰箱緩慢解凍,最后置于室溫完成解凍。如果直接從-20℃拿到室溫或 37 ℃水浴解凍,則非常容易產(chǎn)生沉淀。在解凍過程中,請注意時不時緩慢搖晃血清培養(yǎng)基瓶,減少沉淀的產(chǎn)生。為避免反復凍融,建議將血清分裝使用。
其次是血清的使用和保存,血清沉淀很難預測和避免,出現(xiàn)沉淀后也無需擔憂,這并不會影響血清的品質。已知血清沉淀在以下條件下會有增多的可能:1) 熱滅活;2) 37℃培養(yǎng);3) 反復凍融;4) 伽馬射線照射; 5) 2-8℃長期保存; 6) 長期保存于可自動化霜的冰箱中(溫度不穩(wěn)定)。
5層細胞工廠
在血清的解凍方式、使用和保存中注意操作方式,可以很大程度上避免血清瓶內的血清出現(xiàn)沉淀。如果出現(xiàn)沉淀后,可采用2000 rpm離心5分鐘,取上清使用就好,比過濾方便,不需要另外準備濾心和針筒,又不容易污染。