細(xì)胞傳代是指需要將分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)容器內(nèi)，再進(jìn)行培養(yǎng)的過(guò)程。細(xì)胞培養(yǎng)瓶是傳代過(guò)程中的一種常用耗材，那么細(xì)胞傳代的步驟具體是怎樣的呢？
1、從培養(yǎng)箱取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶，用酒精噴壺在瓶子表面噴灑75%酒精消毒并轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)。
2、打開蓋子，輕輕吸出舊的培養(yǎng)液，用巴氏吸管加入適量PBS緩沖液洗滌1-2次，棄去PBS緩沖液。
3、可用移液器加入1-2ml胰酶，“十字”晃動(dòng)，使胰酶充分接觸細(xì)胞。
4、將加入胰酶的細(xì)胞培養(yǎng)瓶轉(zhuǎn)移到倒置顯微鏡載物臺(tái)，鏡下觀察細(xì)胞消化情況，當(dāng)細(xì)胞變圓且大量脫落時(shí)，準(zhǔn)備終止消化，用75%的酒精噴灑瓶子表面，轉(zhuǎn)移到超凈臺(tái)。
5、用移液器（或巴氏吸管）加入等量含血清培養(yǎng)基，終止消化。移液器充分吹打，使細(xì)胞能夠完全脫落。
6、將瓶中混合液體轉(zhuǎn)移至離心管中，配平，離心5分鐘左右。
7、離心好后，用酒精噴壺噴灑離心管表面，轉(zhuǎn)移進(jìn)超凈臺(tái)，打開蓋子，將上清液倒入廢液缸。
8、加入適量體積含血清培養(yǎng)基，用移液器或巴氏吸管輕輕吹打，制成細(xì)胞懸液。
9、將細(xì)胞懸液分裝進(jìn)2個(gè)（或多個(gè)）潔凈滅菌培養(yǎng)瓶，加入適量培養(yǎng)基，蓋好蓋子。
10、將分裝好的培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡載物臺(tái)，觀察細(xì)胞情況，細(xì)胞應(yīng)保證一定數(shù)量，數(shù)量太少會(huì)影響生長(zhǎng)情況。
11、在瓶子上做標(biāo)記，注明傳代時(shí)間、細(xì)胞種類、操作人員等信息。在放入培養(yǎng)箱之前應(yīng)再次用酒精噴一噴瓶體表面，整理操作臺(tái)，用75%酒精擦拭超凈臺(tái)臺(tái)面，清理廢液和垃圾。
以上是利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行細(xì)胞傳代的具體過(guò)程，注意在操作時(shí)應(yīng)該穿好滅菌服，戴好滅菌手套和口罩，全程注意無(wú)菌操作，避免細(xì)胞受到污染。
