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我們在使用細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)最怕出現(xiàn)的情況可能就是細(xì)胞培養(yǎng)瓶的發(fā)現(xiàn)了污染了，今天富道細(xì)胞來跟大家分析一下細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)的污染情況。

細(xì)胞房要保證干燥整潔，不然很容易染菌。真菌污染后，培養(yǎng)液清亮，培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)絲狀物，細(xì)胞生長變慢，最后由于營養(yǎng)耗盡及毒性作用而使細(xì)胞脫落死亡。一旦發(fā)現(xiàn)真菌污染，可能導(dǎo)致整個(gè)培養(yǎng)箱中的細(xì)胞受到污染。需要徹底清理打掃培養(yǎng)箱、超凈臺、水浴鍋、細(xì)胞房等。

污染培養(yǎng)細(xì)胞的多為煙曲霉、黑曲霉、毛霉菌、孢子霉、白念珠菌、酵母菌等。霉菌污染后多數(shù)在培養(yǎng)液中形成白色或淺黃色漂浮物。一般肉眼可見，較易被發(fā)現(xiàn)，短期內(nèi)培養(yǎng)液多不混濁，倒置顯微鏡下可見于細(xì)胞之間縱橫交錯(cuò)穿行的絲狀、管狀、及樹枝狀菌絲，并懸浮飄蕩在培養(yǎng)液中。很多菌絲在高倍鏡可見到有鏈狀排列的菌珠；念珠菌或酵母菌形態(tài)呈卵形，散在細(xì)胞周邊和細(xì)胞之間生長。

真菌污染多發(fā)生在傳代、換液、加樣等開放性操作中，所以實(shí)驗(yàn)過程一定要注意。發(fā)生污染后，最好是廢棄。雖然抗菌的補(bǔ)救措施，但發(fā)生真菌污染后會對實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生影響，因?yàn)榧?xì)胞培養(yǎng)瓶中出現(xiàn)污染一般是廢棄這瓶細(xì)胞。如果細(xì)胞價(jià)值較大，大家可以參照一些補(bǔ)救措施進(jìn)行補(bǔ)救。

發(fā)生細(xì)菌污染時(shí)，培養(yǎng)液短時(shí)間內(nèi)顏色變黃，出現(xiàn)渾濁現(xiàn)象，顯微鏡下觀察時(shí)，培養(yǎng)液中有大量圓球狀顆粒漂浮，細(xì)胞變圓脫落死亡。細(xì)菌不像真菌有孢子，所以當(dāng)一瓶細(xì)胞出現(xiàn)污染時(shí)，一般不會污染培養(yǎng)箱中其他細(xì)胞，將污染細(xì)胞廢棄就行。有時(shí)需要檢測菌源在哪里，即把培養(yǎng)液、水浴鍋等液體培養(yǎng)驗(yàn)證，如果沒有必要進(jìn)行驗(yàn)證，將這些廢棄即可。

細(xì)胞房中水浴鍋是菌的一大孵育箱，勤換水、滅菌，拿進(jìn)超凈臺的物品多噴酒精，杜絕可能染菌的情況。

支原體污染剛開始難以察覺，有專門的檢測試劑盒檢測。細(xì)胞污染的種類可分成細(xì)菌、酵母菌、霉菌、病毒和支原體。發(fā)生污染后，最好將細(xì)胞廢棄。其主要的污染原因還是無菌操作技術(shù)不當(dāng)、細(xì)胞房超凈臺環(huán)境不佳、血清污染和細(xì)胞污染等。嚴(yán)格無菌操作技術(shù)、清潔的環(huán)境、與品質(zhì)良好之細(xì)胞來源和培養(yǎng)基配制是減低污染的最好方法。