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我們?cè)谑褂?a href="http://www.qqccwx.cn/pyfp.html" target="_blank">細(xì)胞培養(yǎng)瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)出現(xiàn)的問(wèn)題，無(wú)非是細(xì)胞出現(xiàn)污染和細(xì)胞本身出現(xiàn)了問(wèn)題，我們?cè)谥暗奈恼轮兄v述了細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程出現(xiàn)污染的情況，今天富道細(xì)胞來(lái)跟大家介紹一下細(xì)胞本身的兩個(gè)問(wèn)題和解決辦法。

細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中，發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞表面沾了很多死細(xì)胞，傳代過(guò)程中一直存在這種情況呢，富道細(xì)胞有一招百試百靈，那就是用 PBS 洗兩遍之后，加胰酶進(jìn)去，晃一晃，迅速將胰酶倒出，再用 PBS 洗一下，再加胰酶正常消化。死細(xì)胞由于粘附能力很弱，第一次加胰酶進(jìn)去以后會(huì)掉下來(lái)，第二次加胰酶下來(lái)的細(xì)胞才是活性比較強(qiáng)的細(xì)胞。整完一次之后，再次傳代方法同上，一般 2～3 次之后，細(xì)胞就完好如初了。

那在細(xì)胞培養(yǎng)瓶中進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)發(fā)現(xiàn)細(xì)胞胞質(zhì)疏松，狀態(tài)不好，根本就養(yǎng)不起來(lái)，我們可以從血清下手就行，要么換好血清，要么提高血清濃度，血清濃度提高到 15%～20% 培養(yǎng) 48 h，換成正常 10% 的濃度，用高濃度的血清培養(yǎng)時(shí)間過(guò)長(zhǎng)對(duì)細(xì)胞有毒性。

我們?cè)趯?duì)血清下手之后可以同時(shí)采取提高細(xì)胞密度的方法，可以從我們的細(xì)胞培養(yǎng)瓶換到6孔板，12 孔板等，細(xì)胞密度大，細(xì)胞分泌的細(xì)胞因子多，腫瘤細(xì)胞通過(guò)旁分泌途徑促進(jìn)細(xì)胞生長(zhǎng)。

針對(duì)細(xì)胞胞質(zhì)疏松富道細(xì)胞來(lái)跟大家分享一下預(yù)防方法：老化的原因在于細(xì)胞傳代次數(shù)比較多，胰酶消化時(shí)間太長(zhǎng)，這時(shí)候，一定要控制細(xì)胞傳代次數(shù)，注意胰酶消化時(shí)間，胰酶消化時(shí)間過(guò)長(zhǎng)，容易導(dǎo)致細(xì)胞狀態(tài)不佳以及胞質(zhì)疏松。