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細(xì)胞的體外培養(yǎng)技術(shù)是指在無(wú)菌、適當(dāng)?shù)臏囟群鸵欢ǖ臈l件下，使細(xì)胞生存、生長(zhǎng)和繁殖的過(guò)程，細(xì)胞搖瓶是培養(yǎng)懸浮細(xì)胞常用的一種耗材。在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)，了解細(xì)胞的生長(zhǎng)情況，根據(jù)具體情況做出相應(yīng)調(diào)整是試驗(yàn)的必然操作。

一般情況下，我們可以通過(guò)顯微鏡觀察細(xì)胞的狀態(tài)，活細(xì)胞中間透亮、飽滿、有光澤，死細(xì)胞則較暗。此外還可以通過(guò)臺(tái)盼藍(lán)染色法來(lái)計(jì)算細(xì)胞搖瓶中的細(xì)胞活力。臺(tái)盼藍(lán)是一種有機(jī)化合物，常用作細(xì)胞活性染料，用于檢測(cè)細(xì)胞膜的完整性，檢測(cè)細(xì)胞是否存活。活細(xì)胞不會(huì)被染成藍(lán)色，而死細(xì)胞會(huì)被染成淡藍(lán)色。

用品準(zhǔn)備：

1. 4%臺(tái)盼藍(lán)母液：稱取4g臺(tái)盼藍(lán)，加少量蒸餾水研磨，加雙蒸水至100ml，用濾紙過(guò)濾，4度保存。使用時(shí)。用PBS稀釋至0.4%。

2. 吸管、血細(xì)胞計(jì)數(shù)板、顯微鏡

操作步驟：

1、制備單細(xì)胞懸液。并作適當(dāng)稀釋（106 細(xì)胞/ml）

2、染色：細(xì)胞懸液與0.4%臺(tái)盼藍(lán)溶液以9:1混合混勻。

3、計(jì)數(shù)：在三分鐘內(nèi)，用計(jì)數(shù)板分別計(jì)數(shù)活細(xì)胞和死細(xì)胞。

4、活細(xì)胞率（%）= 活細(xì)胞總數(shù)/（活細(xì)胞總數(shù)+死細(xì)胞總數(shù)）×100。

綜上所述，區(qū)分細(xì)胞搖瓶中的活細(xì)胞和死細(xì)胞可以利用以上兩種方法。在利用臺(tái)盼藍(lán)法染細(xì)胞時(shí)，時(shí)間不宜過(guò)長(zhǎng)。否則部分活細(xì)胞也會(huì)著色，干擾計(jì)數(shù)。