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細(xì)胞培養(yǎng)搖瓶在CHO細(xì)胞培養(yǎng)中的應(yīng)用
發(fā)表日期:2022-04-30


細(xì)胞培養(yǎng)搖瓶是一種常用的細(xì)胞培養(yǎng)耗材,主要用于各種懸浮細(xì)胞的培養(yǎng),小容量的瓶子也可以用于培養(yǎng)基的制備或儲(chǔ)存。在培養(yǎng)CHO細(xì)胞時(shí),就會(huì)用到這種耗材。


CHO細(xì)胞是一個(gè)轉(zhuǎn)化細(xì)胞系,1957年從中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞得到,被廣泛地用來(lái)表達(dá)重組DNA的蛋白。在對(duì)CHO細(xì)胞進(jìn)行懸浮培養(yǎng)時(shí),首先將傳代培養(yǎng)基(CD CHO)置于室溫,使其溫度恢復(fù)至室溫后再轉(zhuǎn)入37℃ 搖床內(nèi)預(yù)熱30 min,再利用移液器將種子細(xì)胞液從凍存管內(nèi)吸出打入裝有預(yù)熱培養(yǎng)基的細(xì)胞培養(yǎng)搖瓶?jī)?nèi),加入適量培養(yǎng)液,開始培養(yǎng)。細(xì)胞復(fù)蘇過(guò)程要注意無(wú)菌操作,溶解凍存細(xì)胞時(shí)速度一定要快,避免緩慢升溫細(xì)胞內(nèi)形成冰晶,對(duì)細(xì)胞造成損傷。


細(xì)胞培養(yǎng)瓶


在細(xì)胞培養(yǎng)搖瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)2-3天后,細(xì)胞密度增高,營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)逐漸耗盡,需要對(duì)細(xì)胞進(jìn)行擴(kuò)培。根據(jù)細(xì)胞密度計(jì)算擴(kuò)培體積,當(dāng)達(dá)到反應(yīng)器擴(kuò)培接種細(xì)胞數(shù)量后,停止培養(yǎng),接種至反應(yīng)器進(jìn)行擴(kuò)培。


在利用細(xì)胞培養(yǎng)搖瓶進(jìn)行CHO細(xì)胞的懸浮培養(yǎng)時(shí),一般要借助搖床進(jìn)行規(guī)律的晃動(dòng),以防止細(xì)胞堆積,影響其生長(zhǎng)與繁殖。操作時(shí)還要注意無(wú)菌,避免因?yàn)椴僮鞑划?dāng)引入細(xì)菌污染,對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)造成不良影響。

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