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細(xì)胞培養(yǎng)瓶搖瓶內(nèi)培養(yǎng)液PH下降過快的原因分析
發(fā)表日期:2022-04-24

細(xì)胞生長需要適宜的PH,多數(shù)為7.2-7.4,如果偏離此范圍對(duì)細(xì)胞將產(chǎn)生不利影響。有時(shí)候我們會(huì)遇到細(xì)胞培養(yǎng)瓶中細(xì)胞搖瓶內(nèi)的培養(yǎng)液PH下降過快的情況,這是什么原因?qū)е碌哪兀?


通常細(xì)胞生長得非??鞎r(shí),pH值通常下降得會(huì)非???。這時(shí)候可以通過及時(shí)傳代、提高傳代比例或降低血清量等方法進(jìn)行解決。此外,細(xì)胞培養(yǎng)瓶的蓋子如果擰得太緊、NaHCO3 緩沖系統(tǒng)緩沖能力不夠、培養(yǎng)液中鹽濃度不正確、細(xì)菌、酵母或真菌污染等也能導(dǎo)致pH值通常下降得很快,這時(shí)候可以按以下方法操作:


1.按培養(yǎng)液中NaHCO3 濃度增加或減少培養(yǎng)箱內(nèi)CO2 濃度,2.0g/L 到3.7g/L 濃度NaHCO3對(duì)應(yīng)CO2濃度為5%到10%。


2.改用不依賴CO2培養(yǎng)液。


細(xì)胞培養(yǎng)瓶搖瓶內(nèi)培養(yǎng)液PH下降過快的原因分析


3.松開瓶蓋1/4 圈。加HEPES 緩沖液至10 到25mM終濃度。


4.在CO2 培養(yǎng)環(huán)境中改用基于Earle′s 鹽配制的培養(yǎng)液,在大氣培養(yǎng)環(huán)境中培養(yǎng)改用Hanks 鹽配制的培養(yǎng)液。


5.如果是污染造成的則丟棄培養(yǎng)物,,盡快移到細(xì)胞培養(yǎng)區(qū)域外,培養(yǎng)物經(jīng)84等強(qiáng)氧化劑處理后,倒入水池,或用抗生素除菌。


總之,如果細(xì)胞搖瓶內(nèi)的培養(yǎng)液PH值下降過快,其原因可能是多方面的,找出具體原因才便于采用相應(yīng)的處理方法。

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