細(xì)胞傳代培養(yǎng)是指將培養(yǎng)物分割成小的部分,重新接種到另外的培養(yǎng)器皿(瓶)內(nèi),再進行培養(yǎng)的過程。高效細(xì)胞搖瓶是懸浮細(xì)胞培養(yǎng)常用的耗材,那么怎樣利用高效搖瓶對細(xì)胞進行傳代呢?
從懸浮細(xì)胞的特性上來看,這種細(xì)胞是不貼壁的,所以不需要酶的作用就可以使細(xì)胞從高效搖瓶表面脫離。一般實驗室中常用直接傳代法和離心傳代法來進行懸浮細(xì)胞的傳代。當(dāng)觀察到細(xì)胞長滿至 80%~90%(細(xì)胞懸液變黃)的時候,細(xì)胞就可以進行傳代操作了。
從顯微鏡下觀察,如果細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可以選擇直接傳代法。將高效搖瓶中的培養(yǎng)基按比例分裝到新的培養(yǎng)瓶中,補加新鮮培養(yǎng)基,隔天觀察細(xì)胞密度確定是否需要補液。
如果細(xì)胞狀態(tài)較差時則需要使用離心傳代法,首先將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi),1000rpm 離心 5 min,然后棄去上層清液,輕輕地將細(xì)胞沉淀彈散,使用新鮮的培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,最后用吸管吸取適量細(xì)胞懸液,裝入新的培養(yǎng)瓶,再加入適量的新鮮培養(yǎng)基,繼續(xù)培養(yǎng)。
利用高效搖瓶進行懸浮細(xì)胞的傳代主要有直接傳代法和離心傳代法兩種方式,具體選擇哪種方式進行傳代要根據(jù)細(xì)胞的生長狀態(tài)來確定。
上一篇: 什么是細(xì)胞培養(yǎng)方瓶