在利用細胞搖瓶培養(yǎng)懸浮細胞的過程中,我們經常會出現(xiàn)死細胞和細胞碎片,細胞死亡后由于細胞結構的破壞會釋放出損傷分子,影響活細胞的生長狀態(tài)。那么我們如何去除死細胞呢?目前常用的有以下幾種方法:
1.磁珠分選:磁珠分選是一種在磁場下,通過磁珠標記細胞以達到分選目的的技術。它通過磁場將細胞搖瓶內結合了磁珠與未結合磁珠的細胞分離,篩選出死細胞。
2.密度梯度離心:用一定的介質在離心管內形成一連續(xù)或不連續(xù)的密度梯度,將細胞混懸液或勻漿置于介質的頂部,通過重力或離心力場的作用使細胞分層、分離。此離心法的關鍵是選擇合適的離心轉速和時間。
3.流式分選:是比較傳統(tǒng)的一種分選方法,在分選一些復雜且稀有的細胞類型、需要基于細胞內標記或基于細胞表面標記物表達水平進行分選時,必須使用流式分選,但這種方式對儀器和操作人員技能的要求較高。