細胞培養(yǎng)搖瓶是一種常用的細胞培養(yǎng)耗材,主要用于各種懸浮細胞的培養(yǎng),小容量的瓶子也可以用于培養(yǎng)基的制備或儲存。在培養(yǎng)CHO細胞時,就會用到這種耗材。
CHO細胞是一個轉化細胞系,1957年從得到,被廣泛地用來表達的蛋白。在對CHO細胞進行懸浮培養(yǎng)時,首先將傳代培養(yǎng)基(CD CHO)置于室溫,使其溫度恢復至室溫后再轉入37℃ 搖床內預熱30 min,再利用移液器將種子細胞液從凍存管內吸出打入裝有預熱培養(yǎng)基的細胞培養(yǎng)搖瓶內,加入適量培養(yǎng)液,開始培養(yǎng)。細胞復蘇過程要注意無菌操作,溶解凍存細胞時速度一定要快,避免緩慢升溫細胞內形成冰晶,對細胞造成損傷。
在細胞培養(yǎng)搖瓶內培養(yǎng)2-3天后,細胞密度增高,營養(yǎng)物質逐漸耗盡,需要對細胞進行擴培。根據細胞密度計算擴培體積,當達到反應器擴培接種細胞數量后,停止培養(yǎng),接種至反應器進行擴培。
裝有培養(yǎng)基10層細胞工廠
在利用細胞培養(yǎng)搖瓶進行CHO細胞的懸浮培養(yǎng)時,一般要借助搖床進行規(guī)律的晃動,以防止細胞堆積,影響其生長與繁殖。操作時還要注意無菌,避免因為操作不當引入細菌污染,對細胞生長造成不良影響。