細胞培養(yǎng)瓶一般由聚苯乙烯原料制成,具有高透明度,在貼壁細胞培養(yǎng)中應用比較多。除了作為細胞培養(yǎng)常用耗材外,它還可以用于A2780(人卵巢癌細胞)的儲存。
A2780人卵巢癌細胞系來自未治療患者的腫瘤組織,一般用于科學研究或者工業(yè)應用等非醫(yī)療目的,不可用于人類或動物的臨床診斷或治療,非藥用,非食用。這種細胞通常會選用T75細胞培養(yǎng)瓶作為其運輸與儲存的容器,收到細胞后再近些細胞的復蘇、傳代、凍存等操作。
1)復蘇細胞:將細胞在37度水浴中迅速搖晃解凍,加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入細胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
3)細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。凍存時棄去培養(yǎng)基后加入少量胰酶,細胞變圓脫落后,加入約1ml FBS培養(yǎng)基后加入凍存管中,再添加10%DMSO后進行凍存。
血清培養(yǎng)基瓶250ml
以上是細胞培養(yǎng)瓶在A2780人卵巢癌細胞中的應用,在操作時全程要注意無菌操作,避免對細胞造成污染。