細胞爬片是指讓玻片浸在細胞培養(yǎng)基內(nèi)，細胞在玻片上生長，在做免疫熒光、激光共聚焦、凋亡檢測時，免不了要制備細胞爬片。制備時需要一些耗材，其中細胞培養(yǎng)板是一種必備耗材。具體的制備步驟如下：
1、爬片準備
1）爬片可用一般的蓋玻片，也可用專用細胞爬片?？筛鶕?jù)自己的需要，到染色時再將之切開，這樣既保證了細胞均一性，又可同時做幾個指標的染色剪裁成合適大小，置于6孔細胞培養(yǎng)板、12孔板或24孔板；
2）將剪裁好的爬片，置于濃硫酸中浸泡并過夜，第二天先用自來水沖洗20遍，再置于無水酒清中浸泡6小時，再用三蒸水沖洗3遍，放在玻璃培養(yǎng)皿中烘干后進行高壓消毒。
3）高壓后取出放入烤箱中烤干，放入超凈臺中備用。
2、細胞爬片
1）胰酶消化細胞后計數(shù)重懸細胞于完全培養(yǎng)基中。
2）加細胞時，根據(jù)玻片的大小，先在每個孔里準備放爬片的位置滴少量培養(yǎng)基，目的是使玻片與培養(yǎng)皿靠培養(yǎng)基的張力粘合到一起，然后放玻片，防止加細胞懸液時玻片漂起，造成雙層細胞貼片。整個過程注意無菌操作。
3）根據(jù)自己的需要選擇合適的細胞密度種入細胞培養(yǎng)板內(nèi)即可。
4）待細胞貼壁后，可去上清加含藥培養(yǎng)基。
5）按照實驗設計，作用一定時間后取玻片。如果要做諸如24h，48h，72h等這樣時間點的實驗的話，將所需數(shù)量的爬片取出時應用酒精燈火焰燒一下針頭和鑷子。末取出的可接著繼續(xù)培養(yǎng)。
3、細胞爬片固定
細胞爬片取出后，一般用PBS洗2遍，然后再做固定。如做凋亡的TUNEL染色時就避免洗，因為凋亡的細胞在洗的過程中有可能會脫落。在固定時可以選用冷丙酮、多聚甲醛、95％乙醇等固定液，以達到很好的固定效果。
以上是利用細胞培養(yǎng)板制備細胞爬片的具體過程，爬片的質量絕對了拍照的質量及實驗數(shù)據(jù)的精準性，在操作時要嚴格按照流程進行。
