細(xì)胞培養(yǎng)板是一種多孔結(jié)構(gòu)的細(xì)胞培養(yǎng)耗材，一般由透明的聚苯乙烯原料制成，常見的有6孔、12孔、24孔、48孔、96孔等，主要用于實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)。在細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)中，就用到了這種耗材。
多孔細(xì)胞培養(yǎng)板
細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)是實(shí)驗(yàn)室分析細(xì)胞遷移能力的常用方法，其原理是當(dāng)細(xì)胞長到融合成單層狀態(tài)時，在融合的單層細(xì)胞上人為制造一個空白區(qū)域，稱為“劃痕”。劃痕邊緣的細(xì)胞會逐漸進(jìn)入空白區(qū)域使“劃痕”愈合。在細(xì)胞遷移過程中在開始和定期捕獲圖像，通過比較圖像以確定細(xì)胞遷移速率。其操作過程如下：
1.準(zhǔn)備工作：所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min(超凈臺內(nèi))
2.先用marker筆在細(xì)胞培養(yǎng)板背后，用直尺比著，均勻地劃橫線，大約每隔0.5-1cm一道，橫穿過孔。每孔至少穿過5條線。
96孔細(xì)胞培養(yǎng)板
3.在空中加入約5X105個細(xì)胞，具體數(shù)量因細(xì)胞不同而不同，掌握為過夜能鋪滿。
4.第二天用槍頭比著直尺，盡量垂直于背后的橫線劃痕，槍頭要垂直，不要傾斜。
5.用PBS洗細(xì)胞3次，去除劃下的細(xì)胞，加入無血清培養(yǎng)基。
6.放入37℃5%CO2培養(yǎng)箱培養(yǎng)。按0、6、12、24小時取樣，拍照。
在做細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)時需要注意，在選擇細(xì)胞培養(yǎng)板時盡量選用6孔板，它可以保證有相當(dāng)距離的平直劃痕，因?yàn)橛? 條定位線與劃痕相交，這樣就有 10 個可固定監(jiān)測點(diǎn)，不作重復(fù)，可以減小誤差。
