細胞培養(yǎng)瓶是目前市場上應(yīng)用較多的一類細胞培養(yǎng)耗材，主要適用于貼壁細胞培養(yǎng)。其中在小鼠成纖維細胞傳代中，也用到了這種耗材。
細胞培養(yǎng)瓶
小鼠成纖維細胞是一種用于科學(xué)研究或者工業(yè)應(yīng)用等非醫(yī)療目的特殊細胞，成纖維細胞功能活動旺盛，細胞質(zhì)弱嗜堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化。在收到成纖維細胞后需要在培養(yǎng)箱穩(wěn)定4小時左右再根據(jù)細胞密度、換液培養(yǎng)或傳代。傳代操作遵循以下步驟：
T175細胞培養(yǎng)瓶
1、吸出原細胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤洗細胞兩次，加1~2 ml 0.25% EDTA的胰酶消化（注意把握消化時間，通常控制在1~2min）。
2、鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁運動時（不建議消化到細胞漂?。┤サ粢让?，加6~8ml 完全培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，盡量把細胞層吹落、吹散。
3、取出部分細胞懸液轉(zhuǎn)移到新的細胞培養(yǎng)瓶中，添加適當?shù)耐耆囵B(yǎng)基，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。
4、注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液，待細胞密度達到70-80%時重復(fù)傳代操作或者凍存。
細胞培養(yǎng)瓶在細胞傳代中的主要作用一是儲存細胞，二是為細胞提供貼壁的生長環(huán)境。需要注意的是，如果收到細胞后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶壁破裂、漏液等情況，說明細胞已經(jīng)受到污染，應(yīng)及時聯(lián)系供應(yīng)商。
