流式細胞分析是一種先進的細胞定量分析技術之一，它在細胞水平上通過單抗體對單個細胞或其他生物粒子進行多參數(shù)、快速的。細胞培養(yǎng)板是其常用的一種細胞培養(yǎng)耗材。利用流式細胞測定細胞存活率步驟如下：
多孔細胞培養(yǎng)板
- 取對數(shù)生長期的細胞，以4×105/ml密度接種于6孔細胞培養(yǎng)板上；
- 培養(yǎng)過夜后，用于相應實驗處理；
- 收集處理后的細胞培養(yǎng)液至流式專用管；
- 加1mlPBS緩沖液清洗一次，清洗液加入管中；
- 胰酶消化收集細胞于上述管中；
- 1mlPBS緩沖液清洗剩余細胞一次，清洗液加入離心管；注：3－6步都收集于同一流式專用管。
- 800g離心6min，去上清；
- 加1mlPBS緩沖液重懸細胞，再次離心棄上清；
- 重懸細胞于500 l含5 g/ml碘化丙啶(propidiumiodide,PI)的PBS緩沖液中；
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避光冰上孵育10min,用流式細胞儀測定細胞存活率；
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PI可結合DNA，在一定波長的激發(fā)光作用下可發(fā)出熒光，其強度與DNA含量成正比，但其不能透過完整的細胞膜。而FS（前向散射）則是指示細胞大小的參數(shù)。因此，我們以FS為橫坐標，PI的熒光值的對數(shù)（logPI）為縱坐標，就可將不同大小和不同熒光強度的細胞區(qū)分開：活細胞表現(xiàn)出較大的FS值和較弱的熒光強度；壞死的細胞碎片，由于丟失部分DNA，具有較小的FS值和較弱的熒光性；凋亡細胞的細胞膜具有通透性，細胞雖然聚縮變小，但核保持完整，所以顯示出較小的FS值和較強的熒光強度。通過計算活細胞占所有細胞的百分率，即可得知細胞存活率。
流式細胞分析可以可以高速分析上萬個，并能同時從一個細胞中測得多個參數(shù)，具有速度快、高、準確性好的優(yōu)點。細胞培養(yǎng)板不止應用在流式細胞的分析中，在細胞克隆形成實驗等細胞中初期實驗條件摸索中發(fā)揮著重要作用。
