細胞污染是細胞培養(yǎng)過程中經(jīng)常遇到的問題,如果細胞受到污染將影響其生長狀態(tài),進而對試驗進程造成不好的結(jié)果。那么,在使用細胞培養(yǎng)板培養(yǎng)細胞時,如何避免污染呢?
多孔細胞培養(yǎng)板
常見的細胞污染源包括細菌、真菌、支原體、病毒等,要避免這些污染,在進行細胞操作時應(yīng)該遵循嚴格的無菌原則,各項操作要確保規(guī)范、科學(xué),不對細胞的生長造成額外的影響,其中很重要的一點是保證加樣后細胞的均勻和盡量減少換液對細胞生長狀態(tài)的影響。
96孔細胞培養(yǎng)板
一般96孔細胞培養(yǎng)板的蓋子都很松,屬于半開放式培養(yǎng),這樣的目的是透氣,可以讓培養(yǎng)板外的二氧化碳與內(nèi)部進行充分交換,維持培養(yǎng)基的PH值,但這樣也會增加污染的可能性。如果是這種情況,在操作時要注意保持培養(yǎng)箱內(nèi)空氣的清潔,定期紫外線照射,酒精擦洗,減少開關(guān)培養(yǎng)箱,在培養(yǎng)箱內(nèi)放置無菌蒸餾水的水槽,保持適度為100%,避免液體蒸發(fā)。
細胞污染,預(yù)防是關(guān)鍵。在做好以上工作的同時還要注意,如果是自己所建的細胞系都要早期留有充足的凍存儲備,一旦發(fā)現(xiàn)細胞培養(yǎng)板內(nèi)的細胞受到污染,可以復(fù)蘇早期凍存的細胞使用。