細(xì)胞培養(yǎng)是指在體外模擬體內(nèi)環(huán)境,使之生存、生長、繁殖并維持主要結(jié)構(gòu)和功能的一種方法。在利用細(xì)胞培養(yǎng)瓶進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)過程中會遇到各種各樣的問題,細(xì)胞抱團(tuán)就是比較常見的一類,如果細(xì)胞培養(yǎng)前期多加注意,這種情況是可以避免的。
T175細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)液中含鈣、鎂離子容易導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán),所以洗滌細(xì)胞時要注意使用無鈣鎂平衡鹽的溶液。對于貼壁非常牢固的細(xì)胞,可以分多批多次消化,這樣可以較大程度地降低胰酶對細(xì)胞的損傷,保證細(xì)胞的良好狀態(tài),避免細(xì)胞抱團(tuán)。細(xì)胞生長密度過高也容易導(dǎo)致細(xì)胞成簇,70%-80%的密度就好,這樣可以大大降低細(xì)胞抱團(tuán)的幾率。
如果細(xì)胞已經(jīng)長成集落,可先將細(xì)胞低密度傳代,第二天再消化傳代,這樣連續(xù)傳三次,細(xì)胞抱團(tuán)就會越來越小,幾次傳代后,再按照常規(guī)消化方法和時間能將細(xì)胞逐漸傳成單個的。消化過程中盡量不要使勁搖動細(xì)胞,這樣細(xì)胞特別容易成屑樣脫落。細(xì)胞一旦脫落入懸液里就很難再將其吹打成單個,所以必須要在細(xì)胞未脫落之前將其吹打開,嚴(yán)格控制好消化程度。
培養(yǎng)好細(xì)胞是一門很深的學(xué)問,細(xì)胞的質(zhì)量、培養(yǎng)液成分、細(xì)胞生長密度等都會影響到細(xì)胞的生長。避免細(xì)胞培養(yǎng)瓶內(nèi)的細(xì)胞抱團(tuán)可以從以上幾個方面進(jìn)行把控,這樣才可以確保細(xì)胞培養(yǎng)工作的順利進(jìn)行。