細(xì)胞生長曲線是測定細(xì)胞絕對生長數(shù)的常用方法,也是判定細(xì)胞活力的重要指標(biāo),是培養(yǎng)細(xì)胞生物學(xué)特性的基本參數(shù)之一。細(xì)胞工廠主要用于貼壁細(xì)胞的培養(yǎng),那么,如何繪制細(xì)胞的生長曲線呢?
一般細(xì)胞之后,經(jīng)過短暫的懸浮然后貼壁,隨后度過長短不同的潛伏期,即進(jìn)入大量分裂的指數(shù)生長期。在細(xì)胞達(dá)到后,停止生長,進(jìn)入平頂期,然后退化衰亡。為了準(zhǔn)確描述整個(gè)過程中細(xì)胞數(shù)目的動(dòng)態(tài)變化,典型的可分為生長緩慢的潛伏期,較大的指數(shù)生長期,呈平臺(tái)狀的平頂期及退化衰亡4個(gè)部分。以存活細(xì)胞數(shù)(萬/mL)對培養(yǎng)時(shí)間(h或d)作圖,即得生長曲線。
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1. 潛伏期:消化傳代對細(xì)胞都是有影響的,所以處理過后的細(xì)胞需要重新適應(yīng)新的生長環(huán)境。原代細(xì)胞至少需要24-96小時(shí),永生性細(xì)胞需要6-24小時(shí);
2. 對數(shù)生長期:這個(gè)階段的細(xì)胞數(shù)量呈現(xiàn)對數(shù)增長的趨勢。對數(shù)生長期根據(jù)細(xì)胞種類的不同,時(shí)間長短有所差異,一般在3-5天;
3. 停滯期:一般來說,細(xì)胞最后長滿都會(huì)形成單層,當(dāng)接觸環(huán)境與細(xì)胞數(shù)量達(dá)到相互適宜的程度后,細(xì)胞將不再生長,活動(dòng)處于停滯階段。
通過觀察細(xì)胞工廠中細(xì)胞的生長曲線,可以了解細(xì)胞的生長過程,從而分析細(xì)胞的增殖速度,確定細(xì)胞傳代、凍存、和加藥處理的時(shí)間。