細(xì)胞培養(yǎng)板是小規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)的主要培養(yǎng)耗材，在使用時(shí)我們經(jīng)常會(huì)遇到細(xì)胞聚集、分布不均勻的現(xiàn)象，遇到這種情況該如何解決呢？
遇到細(xì)胞培養(yǎng)板內(nèi)的細(xì)胞分布不均問(wèn)題，首先看細(xì)胞是如何混勻的，是滴管吹打還是振蕩培養(yǎng)板，如果是后者，而且是轉(zhuǎn)圈搖勻的話，很有可能由于離心力的作用使細(xì)胞甩到周邊部分，導(dǎo)致細(xì)胞中間少四周多?？梢栽谂囵B(yǎng)種板之前，將培養(yǎng)板放入培養(yǎng)箱里進(jìn)行幾個(gè)小時(shí)的飽和后再取出，接種細(xì)胞時(shí)力量要輕，可以采用滴頭在板孔的側(cè)面慢慢加入，讓細(xì)胞懸液流入板孔，這樣培養(yǎng)的細(xì)胞基本是均勻生長(zhǎng)。切忌使用振蕩器振蕩，否則細(xì)胞就會(huì)聚積在一起。
T175細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)板孔直徑愈小，細(xì)胞不均現(xiàn)象越明顯，24、96孔板這種現(xiàn)象比較多，因?yàn)橐后w的附壁使得孔內(nèi)培養(yǎng)液不是成一個(gè)液平面，而使用這兩種孔板由于需要加干預(yù)等原因而不能加足量培養(yǎng)液，使得細(xì)胞隨培養(yǎng)液一起出現(xiàn)“邊集”現(xiàn)象，如果為了使孔中央也有均勻細(xì)胞而增加接種細(xì)胞數(shù)量的話，需要觀察何種指標(biāo)，如果是MTT，免疫組化的話會(huì)因?yàn)榧?xì)胞成層而影響結(jié)果。
消化細(xì)胞時(shí)要注意吹打均勻，避免細(xì)胞成團(tuán)，而且細(xì)胞培養(yǎng)板孔內(nèi)的培養(yǎng)液量要足夠，一般接種時(shí)加足量培養(yǎng)液，加干預(yù)時(shí)換一次液，干預(yù)液加培養(yǎng)液量等于接種時(shí)培養(yǎng)液量，這樣的話“邊集”現(xiàn)象會(huì)有所改觀。
