熱原是指能引起恒溫動物體溫異常升高的致熱物質(zhì),如果細胞搖瓶中含有熱原會對細胞的生長與繁殖造成直接影響,因此要控制耗材中的熱原,避免其影響細胞培養(yǎng)進程。
熱原包括細菌性熱原、內(nèi)源性高分子熱原、內(nèi)源性低分子熱原及化學熱原等。細胞搖瓶所說的熱原主要是指細菌性熱原,是某些細菌的尸體及其代謝產(chǎn)物。大多數(shù)微生物都能產(chǎn)生熱原,致熱能力最強的是革蘭氏陰性桿菌的產(chǎn)物,其次是革蘭陽性桿菌類,革蘭陽性球菌則較弱,霉菌、酵母菌、甚至病毒也能產(chǎn)生熱原。它的化學結(jié)構(gòu)是脂多糖和微量蛋白的復(fù)合物。
細胞搖瓶的熱原檢測多采用家兔致熱試驗法,將供試品用無熱原的0.9%氯化鈉注射液浸提,分別注射如3只兔子的耳緣靜脈,注射前測試并記錄兔子的直腸溫度,注射后1-3小時內(nèi)每隔30min測試兔子的直腸溫度并記錄,連續(xù)3h,計算每只兔子的最大升高溫度(與基線溫度相比)并評價供試品浸提液是否引起熱原反應(yīng)。
熱原檢測是細胞搖瓶的一項基本檢測項目,此外其質(zhì)量檢測項目還包括皮內(nèi)刺激、體外細胞毒性、溶出物、吸光度等,這些檢測從不同方面確保了耗材的質(zhì)量。