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在利用細胞工廠培養(yǎng)細胞時，細胞被污染是非常普遍的問題。相對于其他污染，支原體污染細胞后培養(yǎng)基一般不發(fā)生渾濁，所以我們很難通過肉眼判斷。判斷細胞是否受到來自支原體污染，可以通過以下四種方法：

1、DNA熒光染色法

DNA熒光染色法是利用熒光染色劑雙苯咪唑Hoechst33258能夠結(jié)合支原體DNA中的A-T堿基富集區(qū)域的原理，被支原體污染的細胞經(jīng)染色后，其細胞核外與細胞周圍可看到許多大小均一的熒光點，即是富含A-T堿基區(qū)域的支原體DNA。

2、PCR技術

根據(jù)支原體基因組內(nèi)的保守序列設計特異引物，對待檢樣品的核酸進行擴增，通過對擴增產(chǎn)物的大小分析作出診斷。PCR檢測技術用于支原體污染的檢測，周期短、靈敏度高、特異性好、操作簡單且一次可檢測大量樣品。

3、酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）

ELISA用于支原體污染的檢測中，有著良好的特異性和敏感性，一次可以完成大量樣品的檢測。具有簡便、快速與定量定性檢測等特點。

4、電鏡

一般細胞工廠中的細胞培養(yǎng)48～72小時，細胞接近匯合前，用胰酶消化細胞制成細胞懸液后進行固定、包埋、切片后才能進行觀察。
以上是檢測細胞工廠內(nèi)支原體污染時，常用的四種檢測方式。目前已知能污染細胞的支原體有20種以上，其中95%以上都是口腔支原體，所以操作人員在進行細胞培養(yǎng)時要注意無菌操作。