細(xì)胞工廠培養(yǎng)技術(shù)是大規(guī)模細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)常用的方式,溶液是細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)不可或缺的因素,培養(yǎng)植物細(xì)胞要用組織培養(yǎng)液,哺乳動(dòng)物細(xì)胞一般需要小牛血清和特定的培養(yǎng)基,此外,消化終止液也是經(jīng)常用到的一類溶液。
在利用細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞的過(guò)程中,把握好胰酶消化的程度是關(guān)鍵。消化過(guò)度則對(duì)細(xì)胞的活性損傷較大,并有細(xì)胞漂浮,隨棄去的胰酶流失;消化不足則細(xì)胞難以脫落,反復(fù)吹打同樣也會(huì)損傷細(xì)胞活性。影響消化速度的因素較多,主要有胰酶溶液的活性(配制條件、凍存或4℃保存時(shí)間長(zhǎng)短、是否反復(fù)凍融、化凍后存放時(shí)間及溫度等)、消化時(shí)的溫度(氣溫、細(xì)胞培養(yǎng)瓶及胰酶溶液的溫度)以及所加胰酶溶液的多少等。
在培養(yǎng)過(guò)程中要注意觀察細(xì)胞的狀態(tài),在細(xì)胞變圓但未完全脫落時(shí),吸取正在消化的胰酶輕輕吹打細(xì)胞工廠直到細(xì)胞脫落,加入終止液終止消化,混勻細(xì)胞。
如果沒(méi)有專門的終止液,要嚴(yán)格掌握消化時(shí)間,在細(xì)胞被消化到球形還沒(méi)有完全離開細(xì)胞工廠底部壁的時(shí)候,吸取胰酶,加入無(wú)血清培養(yǎng)基吹打細(xì)胞成懸液,轉(zhuǎn)移入離心管反復(fù)沖洗兩次,再接種。操作時(shí)一定要注意動(dòng)作輕柔,避免過(guò)多損傷細(xì)胞。