血清滅活操作步驟如下:
1、選擇一個和培養(yǎng)基瓶一樣的瓶子作為對照瓶,把對照瓶內(nèi)倒入和血清等體積的蒸餾水,作溫度的測量。
2、溫度的調(diào)節(jié)。在對照組的瓶子里插入兩個水銀溫度計,放在水浴箱,在溫度計顯示56度時候,調(diào)節(jié)校準水浴箱的溫度56度。3、將培養(yǎng)基瓶和對照瓶一起放入水浴箱,溫度調(diào)到56度,水浴半小時,滅活之后分瓶裝,做無菌實驗,在-70—-20度下保存。
4、要觀察冰凍血清的顏色和透亮度,顏色偏紅或者顏色偏淺有沉淀表示血清質量不好,因此要選擇質量好的血清滅活。
5、血清的使用要避免多次的反復解凍,會增加血清被污染的概率和降低血清的質量,一但反復解凍的血清出現(xiàn)沉淀那么表示血清不可用或者質量極差。
6、為了保證實驗的結果的穩(wěn)定,保證血清分瓶時候要搖勻,然后分瓶,盡量使用同一血清保證統(tǒng)一變量的原則。
以上是利用培養(yǎng)基瓶進行血清滅活操作的具體步驟,但值得一提的是,在多數(shù)的細胞培養(yǎng)中,血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細胞的生長,反而會破壞血清、增加沉淀狀況。除非文獻指出該細胞必須使用滅活血清,一般細胞培養(yǎng)可省略血清熱滅活步驟。
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