在細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)中,細(xì)胞工廠是常用的一種培養(yǎng)容器。不同于普通的培養(yǎng)耗材,它采用多層結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì),具有培養(yǎng)面積大、占用空間少、可結(jié)合自動(dòng)化設(shè)備使用等優(yōu)勢(shì)。如此特殊的細(xì)胞培養(yǎng)工具,應(yīng)該如何操作呢?
1、用傾倒的方式加入需要量的細(xì)胞懸液到細(xì)胞工廠中,建議每層加入的體積為200ML。
2、加完細(xì)胞懸液后保持側(cè)立,有加液口的一側(cè)背向自己,平衡一段時(shí)間以使液體平均分配到各層。
3、逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)90度,使加液口一面朝上,靜置一段時(shí)間,培養(yǎng)液便會(huì)自動(dòng)平均分配到每一層中。
4、雙手握住進(jìn)液口的一面,慢慢將細(xì)胞工廠放倒,變?yōu)樗椒胖谩?
5、采用十字交叉法混合懸液,然后輕輕地將細(xì)胞工廠移至細(xì)胞培養(yǎng)箱中孵育培養(yǎng)。
6、培養(yǎng)結(jié)束后直接將培養(yǎng)液倒入收集容器。
7、先用PBS清洗一遍(遵循步驟2-4),加入細(xì)胞消化液(建議每層加入的消化液≥15ML/層),重復(fù)步驟2-4,靜置2分鐘(具體視細(xì)胞消化情況而定)。
8、加入適量消化終止液混勻,把細(xì)胞懸液倒入收集容器。
以上是細(xì)胞工廠的操作步驟,細(xì)胞培養(yǎng)是一項(xiàng)精細(xì)化的工作,在操作中要嚴(yán)格按照規(guī)定步驟操作,避免因?yàn)椴僮鞑划?dāng)損傷細(xì)胞,影響后期實(shí)驗(yàn)效果。