細(xì)胞工廠在疫苗制備、慢病毒載體等大規(guī)模的細(xì)胞培養(yǎng)中發(fā)揮著重要作用,在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),各種污染讓人非常頭疼,在污染源中,微生物污染是比較常見的一類污染。
微生物污染是指細(xì)胞在細(xì)胞工廠中生長時(shí)滋生的各種細(xì)菌、霉菌、支原體、黑膠蟲等污染源,這些微生物會(huì)讓細(xì)胞的活力狀態(tài)變差,直至慢慢死亡。
1.細(xì)菌:細(xì)菌污染常見的有大腸桿菌,葡萄球菌等,這種污染較易發(fā)現(xiàn),在普通倒置顯微鏡下為黑色細(xì)沙狀,培養(yǎng)液一般會(huì)在短時(shí)間內(nèi)變黃,有時(shí)靜置的培養(yǎng)液不混,稍加震蕩,變會(huì)有很多混濁物漂起。
2、霉菌:霉菌的污染多數(shù)是白色念珠菌, 曲霉菌,酵母菌等。霉菌污染后培養(yǎng)液短期內(nèi)依舊清亮不變渾濁,倒置顯微鏡下可看見細(xì)胞之間有交錯(cuò)的絲狀,樹枝狀菌絲,漂浮在培養(yǎng)液中。
3、支原體:支原體的大小介于細(xì)菌和病毒之間,是一種獨(dú)立生活的微生物。對(duì)熱敏感,對(duì)一般抗生素不敏感。支原體的形態(tài)多變,多吸附在細(xì)胞表面和細(xì)胞之間。電鏡下觀察,中心有高密度的密集顆粒,橫斷面與細(xì)胞微絨毛相似。
4、黑蛟蟲:黑膠蟲污染后細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),高倍鏡下可看見不規(guī)則的運(yùn)動(dòng)。培養(yǎng)液渾濁不明顯,對(duì)細(xì)胞生長狀態(tài)無太大影響。
以上是細(xì)胞工廠培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)常見的微生物污染,它們對(duì)細(xì)胞生長的影響程度不一,控制好這些污染是保證細(xì)胞良好生長的關(guān)鍵措施。
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