細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)是細(xì)胞生物學(xué)研究方法中重要和常用技術(shù),在生物制藥、細(xì)胞余基因治療等領(lǐng)域具有普遍的應(yīng)用。在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),細(xì)胞搖瓶內(nèi)的細(xì)胞死亡是我們最不愿看到的情況,那么為什么這些細(xì)胞會(huì)死亡呢?
細(xì)胞搖瓶是一種三角形的細(xì)胞培養(yǎng)容器,它由PC或PETG原料加工而成,主要用于懸浮細(xì)胞的培養(yǎng)。懸浮細(xì)胞的生長不依賴于支持物表面,可以在培養(yǎng)液中呈懸浮狀態(tài)生長,如果瓶內(nèi)的細(xì)胞出現(xiàn)死亡,可能考慮以下幾種原因:
1、比較常見的原因可能是細(xì)胞的堆積導(dǎo)致細(xì)胞間出現(xiàn)擠壓而死亡。在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),為了讓細(xì)胞隨時(shí)保持懸浮的狀態(tài),需要借助搖床進(jìn)行培養(yǎng)。如果細(xì)胞出現(xiàn)死亡,首先考慮是不是搖床的振幅設(shè)置有問題,導(dǎo)致細(xì)胞抱團(tuán),從而導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
2、細(xì)胞生長需要借助培養(yǎng)液中的營養(yǎng)物質(zhì),隨著細(xì)胞的不斷擴(kuò)增,培養(yǎng)液中的營養(yǎng)成分也會(huì)消耗殆盡,需要及時(shí)換液,補(bǔ)充新的培養(yǎng)液,為細(xì)胞生長提供所需營養(yǎng)。如果沒有及時(shí)換液,也可能會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞死亡。
以上兩點(diǎn)是導(dǎo)致細(xì)胞搖瓶內(nèi)細(xì)胞死亡的主要原因,此外,培養(yǎng)基及血清的質(zhì)量,操作中的污染也會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞的死亡。