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細(xì)胞裂解是改變細(xì)胞通透性和活性的重要實(shí)驗(yàn)方法，它是指細(xì)胞在被病毒侵染后，病毒利用宿主細(xì)胞中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)合成自己的后代，然后病毒后代使宿主細(xì)胞破壞，從而被釋放出細(xì)胞。

在細(xì)胞裂解實(shí)驗(yàn)中，細(xì)胞培養(yǎng)瓶是一種常用耗材。細(xì)胞裂解的步驟如下：

1.倒掉培養(yǎng)液，并將細(xì)胞培養(yǎng)瓶倒扣在吸水紙上使吸水紙吸干培養(yǎng)液（或?qū)⑵恐绷⒎胖靡粫?huì)兒使殘余培養(yǎng)液流到瓶底然后再用移液器將其吸走）。

2.每瓶細(xì)胞加3ml 4℃預(yù)冷的PBS（0.01M pH7.2～7.3）。平放輕輕搖動(dòng)1min洗滌細(xì)胞，然后棄去洗液。重復(fù)以上操作兩次，共洗細(xì)胞三次以洗去培養(yǎng)液。將PBS棄凈后把培養(yǎng)瓶置于冰上。

3.按1ml裂解液加10ul PMSF（100mM），搖勻置于冰上。（PMSF要搖勻至無(wú)結(jié)晶時(shí)才可與裂解液混合。）

4.每瓶細(xì)胞加400ul含PMSF的裂解液，于冰上裂解30min，為使細(xì)胞充分裂解培養(yǎng)瓶要經(jīng)常來(lái)回?fù)u動(dòng)。

5.裂解完后，用干凈的刮棒將細(xì)胞刮于培養(yǎng)瓶的一側(cè)（動(dòng)作要快），然后用槍將細(xì)胞碎片和裂解液移至1.5ml離心管中。（整個(gè)操作盡量在冰上進(jìn)行。）

6.于4℃下12000rpm離心5min。（提前開離心機(jī)預(yù)冷）

7.將離心后的上清分裝轉(zhuǎn)移倒0.5min的離心管中放于－20℃保存。

細(xì)胞培養(yǎng)瓶不止應(yīng)用于細(xì)胞裂解實(shí)驗(yàn)中，也用于實(shí)驗(yàn)室中等規(guī)模的細(xì)胞和組織培養(yǎng)，如Vero細(xì)胞，HEK 293細(xì)胞、CAR-T細(xì)胞、CHO細(xì)胞、昆蟲細(xì)胞等。