Sf9細胞即草地貪夜蛾細胞,通常用來生產(chǎn)各種藥用蛋白、病毒,或用于基礎(chǔ)研究。在培養(yǎng)sf9細胞時,常用的細胞培養(yǎng)耗材是細胞培養(yǎng)方瓶。
sf9細胞源于美國農(nóng)業(yè)部昆蟲病理實驗室,衍生于IPLBSF-21細胞系,細胞呈規(guī)則的帶有顆粒球形,可以進行懸浮培養(yǎng),也可以進行貼壁培養(yǎng)。這種細胞表達水平高(特別是細胞內(nèi)蛋白),具有較快的生長速度,有效的蛋白折疊,廣泛的翻譯后修飾,糖基化與哺乳動物細胞類似,相對容易地酶促的去糖基化(對于蛋白結(jié)構(gòu)測定有利),在V LPs表達中被廣泛使用。
sf-9細胞為半貼壁細胞系,在含10%胎牛血清的培養(yǎng)基中通常大部分細胞貼壁生長,另有少部分懸浮。在27°C細胞培養(yǎng)箱生長,不需要CO2。通常生長到80-95%密度時可以分瓶傳代。傳代時不需要胰酶消化,通過用1mL移液器輕輕吹打貼壁細胞5-10次,待細胞不貼壁即可稀釋傳代。
細胞培養(yǎng)方瓶常見的規(guī)格包括25cm2 、75cm2 、175cm2 、225cm2 等,經(jīng)過TC處理的表面適用于貼壁細胞培養(yǎng),未經(jīng)TC處理的表面適用于懸浮細胞培養(yǎng),可以滿足sf9細胞的生長及培養(yǎng)需求。
當進行細胞傳代操作時,建議不要劇烈搖晃細胞培養(yǎng)方瓶,以免造成細胞損傷,影響細胞培養(yǎng)進程。
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