細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶是用于細(xì)胞和組織大規(guī)模培養(yǎng)的一次性細(xì)胞培養(yǎng)耗材,在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),有時(shí)候我們會(huì)發(fā)現(xiàn)瓶子底部有沉淀,它除了可能與受到各種微生物污染有關(guān)外,與溫度變化、濃度改變、鈣鹽、金屬等方面也有很大關(guān)系。
在細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),溫度是引起沉淀的主要因素之一。當(dāng)遭遇溫度的極端變化時(shí),高分子量血漿蛋白會(huì)從溶液中析出;熱失活和凍融循環(huán)能促進(jìn)蛋白降解和沉淀;因?yàn)橐后w或重組成培養(yǎng)基在使用之間保持冷藏儲(chǔ)存,鹽可能沉淀,尤其是10x或其他濃縮的儲(chǔ)存液。
如果培養(yǎng)基蒸發(fā),培養(yǎng)基組分(包括鹽) 的濃度將會(huì)增加,特別是培養(yǎng)基表面可能容易形成晶體沉淀。
制備無(wú)血清培養(yǎng)基時(shí),組分添加的順序可能導(dǎo)致不可溶分子的形成。鈣鹽尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應(yīng)產(chǎn)生CaSO4晶體。高壓滅菌和pH值不穩(wěn)定會(huì)加劇這一問(wèn)題。
銅、鐵和鋅等金屬離子是細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的,是無(wú)血清培養(yǎng)基的重要補(bǔ)充物。培養(yǎng)系統(tǒng)中其他血清組分的缺失可能導(dǎo)致這些金屬沉淀,為細(xì)胞形成有毒的環(huán)境。