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細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶中產(chǎn)生沉淀的四大原因分析
發(fā)表日期:2022-02-11

細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶是用于細(xì)胞和組織大規(guī)模培養(yǎng)的一次性細(xì)胞培養(yǎng)耗材,在培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),有時(shí)候我們會(huì)發(fā)現(xiàn)瓶子底部有沉淀,它除了可能與受到各種微生物污染有關(guān)外,與溫度變化、濃度改變、鈣鹽、金屬等方面也有很大關(guān)系。

2L細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶

2L細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶

1、溫度變化

在細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí),溫度是引起沉淀的主要因素之一。當(dāng)遭遇溫度的極端變化時(shí),高分子量血漿蛋白會(huì)從溶液中析出;熱失活和凍融循環(huán)能促進(jìn)蛋白降解和沉淀;因?yàn)橐后w或重組成培養(yǎng)基在使用之間保持冷藏儲(chǔ)存,鹽可能沉淀,尤其是10x或其他濃縮的儲(chǔ)存液。

2、失水誘導(dǎo)的濃度改變

如果培養(yǎng)基蒸發(fā),培養(yǎng)基組分(包括鹽) 的濃度將會(huì)增加,特別是培養(yǎng)基表面可能容易形成晶體沉淀。

5L細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶

5L細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶

3、鈣鹽

制備無(wú)血清培養(yǎng)基時(shí),組分添加的順序可能導(dǎo)致不可溶分子的形成。鈣鹽尤其容易沉淀,比如CaCl2和MgSO4在溶液中反應(yīng)產(chǎn)生CaSO4晶體。高壓滅菌和pH值不穩(wěn)定會(huì)加劇這一問(wèn)題。


PETG血清培養(yǎng)基瓶

4、金屬補(bǔ)充物

銅、鐵和鋅等金屬離子是細(xì)胞生長(zhǎng)所必需的,是無(wú)血清培養(yǎng)基的重要補(bǔ)充物。培養(yǎng)系統(tǒng)中其他血清組分的缺失可能導(dǎo)致這些金屬沉淀,為細(xì)胞形成有毒的環(huán)境。

在利用細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)細(xì)胞時(shí)要注意到以上幾個(gè)因素的影響,并采取相應(yīng)錯(cuò)誤盡可能的避免沉淀的產(chǎn)生,確保細(xì)胞的正常生長(zhǎng)與增殖。
注:部分內(nèi)容源于merck生命科學(xué)
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