細胞搖瓶在液體菌種培養(yǎng)中具有普遍的應用,靈芝就是采用的這種培養(yǎng)方式。靈芝液體發(fā)酵培養(yǎng)菌絲生長快,一般在45天就可完成一次發(fā)酵。液體發(fā)酵時由于所用培養(yǎng)原料都為速效養(yǎng)分又不斷攪拌,所以一旦感染雜菌就會馬上大量繁殖從而造成發(fā)酵失敗。所以液體深層培養(yǎng)對培養(yǎng)基有以下要求:
1. 液體發(fā)酵培養(yǎng)需要速效的配伍培養(yǎng)基,適當?shù)膒H、溫度和通風條件。
2. 液體深層發(fā)酵培養(yǎng)需要碳源養(yǎng)分、氮源養(yǎng)分和微量元素養(yǎng)分。
3. 靈芝深層發(fā)酵所需要的碳源養(yǎng)分有葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、淀粉等,其中盡量好利用葡萄糖。
4. 葡萄糖、麥芽糖、蔗糖是小分子糖,培養(yǎng)基中用量過高時會使?jié)B透壓提高從而會使菌絲內的水分外滲造成生理缺水而生長不出或不能生長。
5. 淀粉是一種大分子的物質在水溶液不易形成高滲現(xiàn)象,所以用玉米粉或淀粉做碳源養(yǎng)分時,淀粉用量可提高可達到5-6%左右。
6. 氮源是構成細胞的主要物質,液體發(fā)酵通常用的氮源物資有玉米漿、玉米粉、魚粉、蠶蛹粉、酵粉等。
7. 靈芝深層培養(yǎng)需要的金屬元素主要是P、K、Mg、Ca、Zn、S等元素的無機鹽,其中對P、K、Mg的需要量比較多。
8. 除P元素外靈芝對這些金屬元素的要求只要培養(yǎng)基總量的百萬分之幾即可。由于需要量甚微一般天然培養(yǎng)基中所含有的微量元素已足夠其生長之用。
利用細胞搖瓶培養(yǎng)靈芝時,一定要注意以上幾點。此外還需要合適的酸堿度、溫度條件、通氣等條件,控制好接種量,才能保證菌絲的正常發(fā)酵。