傳代培養(yǎng)是指需要將分割成小的部分，重新接種到另外的培養(yǎng)器皿（瓶）內，再進行培養(yǎng)的過程。細胞培養(yǎng)瓶是培養(yǎng)細胞時常用的耗材，那么，如何對瓶內的細胞進行傳代操作呢？
T225細胞培養(yǎng)瓶
一般在細胞培養(yǎng)瓶內的細胞長成致密單層后基本飽和，為了使細胞能夠繼續(xù)生殖，同時擴大細胞數(shù)量，就需要進行傳代操作。懸浮細胞直接分瓶就可以，而貼壁細胞需要經過消化后才能分瓶。一般使用蛋白水解酶（比如胰蛋白酶）消化貼壁細胞成單個細胞，也可加入乙二胺四乙酸（EDTA）提高消化能力。觀察細胞直到細胞變圓脫離瓶壁，此過程往往需要5-15分鐘，為了避免細胞成團，消化細胞的過程中不要拍打細胞培養(yǎng)瓶。
對于特別難消化的細胞，可以加入胰酶EDTA 消化液后把細胞置于37°C 促進消化，細胞脫離瓶壁后，立刻加入含有血清的完全培養(yǎng)基中止消化，血清中某些蛋白質能夠抑制胰酶的活性。一般情況下，離心并不是必需的。如果細胞需要無血清或者低血清的培養(yǎng)基，可以以125000g 轉速離心5分鐘，然后棄去中止用的培養(yǎng)基，加入適合的新的培養(yǎng)基輕輕混勻細胞再傳代。
細胞傳代的比例一般是1:2-1:20，具體要視細胞的類型而定。在傳代過程中，胰蛋白酶會對一些細胞的細胞膜產生損傷，可以用細胞刮輕輕刮下細胞，加入適量的培養(yǎng)基，輕輕吹打混勻細胞，移入到新的培養(yǎng)瓶。
