Sf9細(xì)胞即草地貪夜蛾細(xì)胞,通常用來生產(chǎn)各種藥用蛋白、病毒,或用于基礎(chǔ)研究。在培養(yǎng)sf9細(xì)胞時,常用的細(xì)胞培養(yǎng)耗材是細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
sf9細(xì)胞源于美國農(nóng)業(yè)部昆蟲病理實驗室,衍生于IPLBSF-21細(xì)胞系,細(xì)胞呈規(guī)則的帶有顆粒球形,可以進(jìn)行懸浮培養(yǎng),也可以進(jìn)行貼壁培養(yǎng)。這種細(xì)胞表達(dá)水平高(特別是細(xì)胞內(nèi)蛋白),具有較快的生長速度,有效的蛋白折疊,廣泛的翻譯后修飾,糖基化與哺乳動物細(xì)胞類似,相對容易地酶促的去糖基化(對于蛋白結(jié)構(gòu)測定有利),在V LPs表達(dá)中被廣泛使用。
sf-9細(xì)胞為半貼壁細(xì)胞系,在含10%胎牛血清的培養(yǎng)基中通常大部分細(xì)胞貼壁生長,另有少部分懸浮。在27°C細(xì)胞培養(yǎng)箱生長,不需要CO2。通常生長到80-95%密度時可以分瓶傳代。傳代時不需要胰酶消化,通過用1mL移液器輕輕吹打貼壁細(xì)胞5-10次,待細(xì)胞不貼壁即可稀釋傳代。細(xì)胞培養(yǎng)方瓶常見的規(guī)格包括25cm2 、75cm2 、175cm2 、225cm2 等,經(jīng)過TC處理的表面適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),未經(jīng)TC處理的表面適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),可以滿足sf9細(xì)胞的生長及培養(yǎng)需求。
當(dāng)進(jìn)行細(xì)胞傳代操作時,建議不要劇烈搖晃細(xì)胞培養(yǎng)瓶,以免造成細(xì)胞損傷,影響細(xì)胞培養(yǎng)進(jìn)程。