“邊緣效應(yīng)”是96孔板在使用過(guò)程中經(jīng)常遇到的情況,尤其在酶聯(lián)免疫反應(yīng)中比較常見(jiàn),這種情況會(huì)導(dǎo)致邊緣孔內(nèi)細(xì)胞的生長(zhǎng)速度放緩,直接影響試驗(yàn)結(jié)果。出現(xiàn)這種情況可通過(guò)以下幾種方法處理:
1. 預(yù)孵育:使用水浴或在將反應(yīng)溶液加入至96孔板中時(shí),將板和溶液均加熱至溫育溫度(如37℃),就可以很容易地排除“邊緣效應(yīng)”,并且可提高測(cè)定的重復(fù)性。另外,有研究發(fā)現(xiàn)將鋪好的細(xì)胞在室溫先放置一個(gè)小時(shí),待細(xì)胞完成沉降和貼壁后再放回37℃培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng),也可顯著改善邊緣效應(yīng)。
2. 使用防揮發(fā)蓋:已有人針對(duì)多孔板揮發(fā)效應(yīng)導(dǎo)致的邊緣效應(yīng),開(kāi)發(fā)了一種防揮發(fā)的多孔板蓋。該多孔板蓋可以在多孔板上方形成飽和的水蒸氣層成為一個(gè)蒸汽屏蔽,將多孔板內(nèi)環(huán)境與實(shí)驗(yàn)室環(huán)境隔絕,從而更好的維持多孔板處在一個(gè)相對(duì)穩(wěn)定的狀態(tài)下。
3. 放棄周邊孔:在上述方法不能解決時(shí),為了得到更可靠的試驗(yàn)結(jié)果,最直接簡(jiǎn)單的方法就是不用這些周邊的孔。
以上是防止96孔板出現(xiàn)邊緣效應(yīng)的解決辦法,掌握這些處理方式可以減少邊緣效應(yīng)對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的影響。