293細(xì)胞即人腎系,是腺病毒載體的包裝細(xì)胞,也是一種很常用的表達(dá)研究的細(xì)胞株。細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)是293細(xì)胞諸多培養(yǎng)方式中的一種。
293 細(xì)胞是用5型腺病毒75株系轉(zhuǎn)化,含有Ad5 E1區(qū)的人胚腎細(xì)胞。它貼壁依賴型成上皮樣細(xì)胞,表現(xiàn)出典型的腺病毒轉(zhuǎn)化細(xì)胞的表型,細(xì)胞允許Ad5和其他血清型腺病毒在其上增殖。293細(xì)胞為人亞三倍體細(xì)胞系,在無(wú)Ca2+或含Ca2+培養(yǎng)基中可同樣生長(zhǎng),也可生長(zhǎng)在血清濃度降低的培養(yǎng)基中。
細(xì)胞轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)一般用于小量培養(yǎng)到大規(guī)模培養(yǎng)的過(guò)渡階段,或作為生物反應(yīng)器接種細(xì)胞準(zhǔn)備的一條途徑。與傳統(tǒng)靜止單層培養(yǎng)相比,轉(zhuǎn)瓶具有三大優(yōu)點(diǎn):為細(xì)胞提供較大的生長(zhǎng)表面;輕微的轉(zhuǎn)動(dòng)可以防止培養(yǎng)液中形成的某些成分對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)可能產(chǎn)生的影響;細(xì)胞大部分時(shí)間僅覆蓋一薄層培養(yǎng)液,有利于氣體交換。
由于293細(xì)胞對(duì)生長(zhǎng)環(huán)境的改變較為敏感,細(xì)胞容易成團(tuán),想要均勻貼壁,需要維持穩(wěn)定的溫度、酸堿度和轉(zhuǎn)動(dòng)速度。這里的溫度不止指環(huán)境溫度,培養(yǎng)液的溫度也要控制好。