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96孔酶標板是一種配合在酶標儀上，用來做酶聯(lián)免疫實驗的器材，是酶聯(lián)免疫反應(yīng)實驗中的重要載體工具。在使用時需要按照既定的步驟進行，一般情況，使用方法如下：

1、加樣品：將標本稀釋液加到包被板內(nèi)，將需要檢測的血清用PBS或生理鹽水按照1：20的比例稀釋后取10ul加入到96孔酶標板的反應(yīng)孔內(nèi)。

96孔酶標板

2、加對照：加入陰性對照3孔，陽性對照1孔，還有100ul的對照血清。

3、進行溫育：將反應(yīng)板震蕩，使樣品充分的混勻，置于37℃的溫箱或者水浴反應(yīng)20分鐘的時間。

4、洗板：用蒸餾水將洗滌液15ml稀釋至300ml的體積。手洗的時候應(yīng)該將反應(yīng)板孔內(nèi)的容物傾出，將洗滌液注滿反應(yīng)孔的位置，然后放置30秒鐘后用力甩去，這樣的動作重復5次后開始拍干。機洗需要進行5次，每孔注入洗滌液200ul或者可以注滿，然后停留30秒鐘后吸盡拍干。

5、加酶標工作液：在每孔內(nèi)加入100ul的酶標工作液，放置到37℃的溫箱中，反應(yīng)20分鐘后洗板5次，洗板的操作和上述步驟4是相同的。

6、這是反應(yīng)的最后一步，就是顯色和終止反應(yīng)：將底物50ul加到反應(yīng)孔內(nèi)，37℃條件下避光顯色10分鐘的時間。在每孔內(nèi)加入終止液50ul混勻用以終止反應(yīng)。

96孔酶標版的使用需要在無菌的條件下進行，因此在使用前需要進行消毒，但需要注意的是有的酶標板在消毒之前需要認真的閱讀說明書，看是否可以進行高溫消毒。